Für Jonathan Tucker war "Sleepers" der zweite Spielfilm; er spielte bereits 1994 eine Nebenrolle im Bud Spencer und Terence Hill-Streifen "Dir Troublemaker". 1996 folgte dann "Sleepers" in dem er die Rolle des jungen Thomas "Tommy" Marcano besetzt.

Er spielte Nebenrollen in "The Virgin Suicides" (1999), Hostage (2005), Pulse (2006) und weiteren. In Remake "The Texas Chainsaw Massacre" (2003) spielt er eine Hauptrolle. Seinen letzten Auftritt in einem Film hatte er 2010 in "72 Stunden - The Next Three Days".

Neben seiner Filmkarriere wirkte Tucker an zahlreichen Fernsehserien mit, darunter "Law&Order: Criminal Intent", "Criminal Minds" und in diesem Jahr "Hannibal".